Efter absorption,vitamin D3skal gennemgå metabolisk aktivering, før den kan udøve sin biologiske funktion. I leveren er cholecalciferol 25-hydroxyleret til dannelse af 25-hydroxycholecalciferol [25-(OH)-D3], efterfulgt af 1-alfa-hydroxylering i nyren til dannelse af 1,25-dihydroxycholecalciferol [1,25-(OH)2- D3]. Nyren er nøgleorganet for produktionen af aktivt vitamin D [1,25-(OH)2-D3].

Faktorer der påvirkervitamin D3niveauer er alt, der forstyrrer produktionen af D-vitamin i kroppens's hud, inklusive lever- og nyresygdomme, som kan føre til D-vitaminmangel. synes godt om:
- Kronisk sygdom eller handicap, der forhindrer regelmæssig soleksponering
- Bor i områder over 37 grader nordlig bredde eller under 37 grader sydlig bredde om vinteren, men det kan diskuteres
-Mørkhudede mennesker og ældre voksne producerer mindre D-vitamin
